RNA干扰和洛拉曲克对结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达及细胞增殖的影响
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摘要
目的 探讨下调胸苷酸合成酶(TS)基因以及化疗药洛拉曲克对人结直肠癌LOVO细胞胸苷酸合成酶表达水平以及对细胞生长、凋亡的影响.方法 构建针对人TS基因的小分子干扰RNA(siRNA)和阴性对照,转染至LOVO细胞,利用RT-PCR和Western blot技术观察沉默TS基因后其基因和蛋白表达水平的变化,MTT法检测细胞增殖情况;另联合洛拉曲克作用于LOVO细胞,观察两者对LOVO细胞的TS蛋白表达和细胞生长的影响.结果 转染TS siRNA后,LOVO细胞TS mRNA及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组,细胞增殖速度亦低于对照组(均P＜0.05).TS siRNA联合洛拉曲克组细胞IC50值为(1.46±0.25)μmol/L,而阴性对照组和单用洛拉曲克组的IC50值分别为(6.81±0.31)μmol/L和(6.47±0.43)μmol/L.TS siRNA联合洛拉曲克作用于细胞36 h后,细胞凋亡指数为(62.12±0.89)％,高于单用TS siRNA和洛拉曲克[(21.56±0.67)％和(40.51±0.83)％,均P＜0.05].结论 TS siRNA可以下调人LOVO细胞中TS基因和蛋白的表达,使细胞生长速度减慢,凋亡增加,并可以增强洛拉曲克的药物敏感性.
关键词
结直肠肿瘤;RNA干扰;洛拉曲克;胸苷酸合成酶
基本信息
