FSH通过调控HMGCR对肝脏胆固醇合成的影响及分子机制
成果完成人
项目完成单位
山东第一医科大学附属省立医院(山东省立医院)
成果简介
FSH通过与卵巢FSHR结合,发挥其作用。证明肝细胞表面有FSH受体存在,是阐明FSH调 节肝脏胆固醇的基础。因此,以卵巢的FSHR为阳性对照,进行了如下实验：肝脏FSHR mRNA 序列 验证。设计FSHR细胞膜外、内引物,分别检测到来源于人和小鼠肝脏存在FSHR 产物,序列与卵巢的 FSHR序列相同。原位杂交验证,人和小鼠肝脏检测到FSHR表达。验证蛋白结构域位点。针对N-,C-端 ,选用不同抗体进行western blotting . 显示蛋白KD 与卵巢FSHR 的KD一致。蛋白定位,免疫 荧光实验证实FSHR 存在于肝细胞表面。体外实验获得相似结果,选用HepG2 和小鼠 NCTC 1469 细胞系(卵巢 CHO为阳性对照)进行体外实验, 获得与体内相似的结果。放射性竞争结合实验显 示FSH与FSHR 结合具有特异性。FSH主要通过与细胞表面FSHR结合完成细胞内信号传递过程,而FSHR 属于G蛋白偶联受体家族(GPCR)。通过对GPCR活化后的一些激酶进行筛查,发现FSH可以显著促进丝 氨酸/苏氨酸激酶(Akt)的磷酸化(p-Akt)。同时,肝细胞内加入Akt不同阻断剂后,FSH对SREBP-2 及HMGCR的上调作用都显著降低;发现当β-arrestin2敲减后FSH上调p-Akt和HMGCR作用显著减弱。
基本信息
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所属机构:内分泌
归属医师:赵家军
年份:2021
公布年份:2021-03-01
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