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存活素反义寡脱氧核苷酸对人恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响
曹永倩;王法刚;霍然;蔡景龙;冯永强;李强;王一兵
中华烧伤杂志 2010年 26卷2期 页码:128-132页,共5页 影响因子:0.829
寡核苷酸类,反义;黑色素瘤;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3;存活素
目的 了解存活素反义寡脱氧核苷酸(ASODN)对人恶性黑色素瘤细胞(hMMC)增殖和凋亡的影响.方法 取对数生长期hMMC株A375,按随机数字表法分为对照组(不转染)、正义链组(转染600 nmol/L存活素正义寡脱氧核苷酸)、错义链组(转染600 nmol/L存活素错义寡脱氧核苷酸)、脂质体组(仅用脂质体处理)、反义链组(转染存活素ASODN,根据转染物浓度再分为200、400、600 nmol/L 3个亚组),倒置荧光显微镜下观察转染效果.采用噻唑蓝法测定细胞存活情况并计算细胞增殖抑制率,双变量流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,蛋白质印迹法检测存活素蛋白的表达,激酶法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的活性.对数据进行方差分析.结果 (1)正义链组、错义链组、反义链600 nmol/L组细胞转染率均大于80%.(2)反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞增殖抑制率[(10.30±0.56)%、(16.69±0.58)%、(24.67±0.67)%]较正义链组[(5.23±0.25)%]、错义链组[(5.09±0.13)%]、脂质体组[(4.70±0.45)%]显著增加(F=746.91,P值均小于0.05),且随转染时间延长,增殖抑制率增加明显.(3)反义链200、400、600nmol/L组转染后24 h细胞凋亡率分别为(13.5±1.9)%、(20.1±1.5)%、(32.1±2.9)%,显著高于对照组、正义链组、错义链组、脂质体组的(6.5±0.6)%、(5.6±0.7)%、(6.4±1.0)%、(6.5±1.3)%(F=139.9,P值均小于0.05),细胞被阻滞在G2/M期.(4)与对照组比较,反义链各浓度组存活素蛋白表达量减少,caspase-3活性明显增高(F=63.1,P值均小于0.05);正义链组、错义链组、脂质体组caspase-3活性与对照组比较,差异无统计学意义(F=0.512,P值均大于0.05).结论 存活素ASODN能够呈浓度-时间依赖性抑制hMMC株A375增殖,诱导G2/M期阻滞,促进其凋亡.
紫杉醇对黑素瘤细胞A375体外抑制作用
曹永倩;王法刚;冯永强;李强;王一兵
中国麻风皮肤病杂志 2010年 26卷4期 页码:239-242页,共4页 影响因子:0.215
紫杉醇;恶性黑素瘤;生存素
目的:确定紫杉醇在体外对A375细胞凋亡的影响.方法:不同浓度紫杉醇分别作用A375细胞24 h、48 h和72 h后,用MTT法测定对细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡的变化,Western blot检测生存素(Survivin)的表达.结果:紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制细胞增殖,但高浓度组(1000 nmol/L)与低浓度组(100 nmol/L)在促进细胞凋亡及周期阻滞方面均无明显差异(P>0.05).不同浓度紫杉醇作用细胞24 h后,Survivin表达逐渐升高,48 h后其表达逐渐减弱,至72 h与对照组相比无显著性差异.结论:紫杉醇对A375细胞的生长抑制作用在一定浓度范围内呈浓度时间依赖性,抑制Survivin的表达是紫杉醇诱导细胞凋亡的途径之一.Survivin的表达与瘤细胞对紫杉醇产生抗药性有关.
严重烧伤患者休克期并发脓毒症的临床分析
曹永倩;王德昌
中华烧伤杂志 2004年 20卷3期 页码:155-157页,共3页 影响因子:0.829
烧伤;休克;脓毒症;感染
目的探讨严重烧伤患者休克期并发脓毒症的原因、防治措施及预后.方法随机抽取笔者单位1992年5月~1999年12月收治的特重度烧伤患者44例(伤后48 h内入院).依据脓毒症和肠源性感染诊断标准,结合患者创面及血液细菌培养结果,计算休克期内脓毒症的发生率,探讨肠源性感染的可能性.分析本组患者入院后的抗生素使用情况.观察脓毒症患者休克期内其他并发症的发生情况,并分析其预后.结果 44例患者中4例于休克期内发生脓毒症,占9.09%,其中l例由铜绿假单胞菌引起,3例分别由大肠杆菌、粪肠球菌、产气杆菌引起.所有患者人院后给予抗生素,然后结合临床征象、创面及血液细菌培养结果、药敏试验结果选用敏感抗生素.4例脓毒症患者中休克期内并发严重水、电解质紊乱1例次、应激性溃疡2例次、急性肾功能衰竭2例次.最终1例治愈,3例死亡.结论肠道杆菌感染是严重烧伤休克期发生脓毒症的原因之一,休克与脓毒症互为因果,互相促进.烧伤后早期应用对肠道菌群敏感的抗生素是防治休克期脓毒症的重要措施.
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